免疫组织化学分析和流式细胞术均是检测和评估CD30的重要方式，二者孰优孰劣呢？
CD30是一种属于肿瘤坏死因子受体超家族的跨膜糖蛋白受体（kd），于年由KarlLennert的研究团队在德国基尔（Kiel）发现，CD30最初也被命名为Ki-1[1]。
CD30在正常活化的淋巴细胞呈有限表达，而在淋巴瘤细胞[尤其是间变性大细胞淋巴瘤和经典型霍奇金淋巴瘤]呈高表达[2，3]。随着首款靶向CD30的抗体偶联药物注射用维布妥昔单抗在国内外的获批，CD30阳性淋巴瘤的治疗出现了新的契机（注：注射用维布妥昔单抗在国内获批用于以下CD30阳性淋巴瘤成人患者：复发或难治性系统性间变性大细胞淋巴瘤（sALCL）和复发或难治性经典型霍奇金淋巴瘤（cHL)）。
当然，维布妥昔单抗的应用有赖于对CD30淋巴瘤的诊断，也因此绕不开对CD30表达的检测与评估，这相当于PD-1/PD-L1检测之于免疫检查点抑制剂的应用，或HER2检测之于曲妥珠单抗的应用。
CD30的检测与评估方法包括免疫组织化学（IHC），流式细胞术（FCM）和酶联免疫吸附测定（ELISA）。研究者发现，作为预测患者生存预后的生物标志物，CD30的表达并不总是与维布妥昔单抗治疗的疗效相关[1，4]，这是否与CD30检测方法的选择有关呢？
CD30表达的检测/评估方式：IHC和FCM孰优孰劣？
对于淋巴瘤细胞膜表面CD30的表达情况，可仅通过IHC或联合FCM进行评估[1]。淋巴结活检中检测CD30通常依靠IHC，在病理室也一直被认为是CD30检测的“金标准”[4]。然而，随着临床实践的更新，切除淋巴结进行活检在许多医疗中心的应用正逐渐减少，用细针穿刺留取新鲜组织并进行FCM分析在疑似淋巴瘤病例中的应用则越来越多[1]。
不过，IHC和FCM的优劣势仍需客观看待。
IHC的优势IHC基于石蜡包埋福尔马林固定切片进行，而石蜡切片可保持组织结构特征，可以说这是IHC研究CD30表达的优势之一。其他优势例如：IHC可对形态学检查作重要补充；在充分固定且经过良好处理的组织上，IHC结果通常是可重复的；IHC特别适用于局限性或局灶性受累的淋巴瘤（例如霍奇金淋巴瘤、富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤）[1]。
IHC的局限性IHC分析基于阳性细胞计数，但我们区分阳性和阴性细胞的敏感度是可变的，肿瘤细胞与反应性细胞有时很难区分，特别是仅有少量细胞为阳性时。此外，IHC标准化仍是一个挑战，因为IHC结果可能在很大程度上取决于操作者。这些外部因素可能影响临床试验，并产生与实际相悖的结果[4]。
FCM的优势FCM基于生物体液（外周血、骨髓穿刺液、胸腔积液、脑脊液、脑活检冲洗液等）和新鲜组织（淋巴结、肿瘤、活组织检查等）细胞悬浮液进行[4]。在细胞样本充足的情况下，FCM具有较高的灵敏度、快速的周转时间和更可能量化的优势[1]。FCM可以同时检测许多抗原，从而有助于将肿瘤细胞与反应性细胞区分开；即使表达较弱，也可以使用中位荧光强度（MFI）量化细胞表面蛋白质的表达；FCM易于标准化[4]。
FCM的其他优势还包括，它更适合IHC评估不理想的组织（即具有明显的挤压伪影的组织）；可降低观察者间的解释主观性等[1]。
FCM的局限性例如，FCM不能从低肿瘤负荷和低活性（坏死）样本中检出肿瘤细胞等[1]。
CD30评估的新方向：CD30标准化中位荧光强度的应用
IHC不能将CD30表面染色与胞浆内染色区分开，即使CD30表达仅存在于胞浆内，IHC分析结果也可以是CD30阳性表达。根据维布妥昔单抗的作用原理：其必须与细胞表面的CD30结合才能被内化并转运至溶酶体，然后释放甲基澳瑞他汀E（MMAE），进而启动细胞周期停滞和凋亡。所以说，IHC检测结果可能影响CD30表达水平与维布妥昔单抗疗效关系的解读。
为了让CD30检测更好地预测CD30阳性淋巴瘤的治疗效果，法国多中心MFI30研究在非霍奇金淋巴瘤中，通过FCM对CD30表达强度进行了标准化和评估[4]。
该研究提出了CD30标准化中位荧光强度（nMFI30）值，反映所有肿瘤细胞的CD30强度。
1.在研究的第一阶段，研究人员通过比较实验室间的细胞系CD30MFI表达，证明多中心标准化CD30表达可行。在研究的第二阶段，研究人员通过在标准化流式细胞仪上使用3种不同Abs的nMFI30对例病例进行分析，结果发现CD30的多中心标准化FCM可以改善病例的CD30检测准确度。
2.在纳入的例病例中，88例（55％）还进行了IHC分析。在FCM结果强阳性组的所有病例、弱阳性组的57％病例和不一致组的59％病例中，IHC结果均为阳性。而IHC结果为阴性病例的FCM结果呈阴性的有81％。
若FCM不一致组被认为是阳性，则在77％（68/88）病例中IHC结果与FCM结果一致，在11％（10/88）病例中FCM的敏感性更高。对于FCM阳性而IHC呈现的假阴性结果可以通过所使用抗体克隆之间的差异或技术本身来解释。
总之，这项基于MFI30的研究强调了FCM分析在CD30标准化和量化中的作用，这有助于确定用于诊断或治疗的CD30阈值。若把这种使用特异性CD30抗体的FCM策略纳入维布妥昔单抗临床试验，或将更好地帮助解读临床结果，并可能将药物拓展到其他各种CD30阳性淋巴瘤中。
结语
IHC和FCM均是评估/检测CD30的可靠方式[1]。未来还需进一步探究CD30评估/检测与解读，如此才能最大化IHC和FCM在CD30阳性淋巴瘤诊疗中的价值！
参考文献[1]XuML,GabaliA,HsiED,etal.PracticalApproachesonCD30DetectionandReportinginLymphomaDiagnosis[J].AmJSurgPathol.Feb;44(2):e1-e14.
[2]vanderWeydenCA,PileriSA,FeldmanAL,etal.UnderstandingCD30biologyandtherapeutictargeting:ahistoricalperspectiveprovidinginsightintofuturedirections[J].BloodCancerJ.;7(9):e.
[3]SchirrmannT,SteinwandM,WezlerX,etal.CD30asatherapeutictargetforlymphoma[J].BioDrugs.;28(2):-.
[4]DebliquisA,BaseggioL,BouyerS,etal.MulticentricMFI30study:StandardizationofflowcytometryanalysisofCD30expressioninnon-Hodgkinlymphoma[J].CytometryBClinCytom.Aug17.
VV-MEDMAT-
责任编辑：Amiee排版编辑：YJK版权声明本资讯旨在帮助医疗卫生专业人士更好地了解相关疾病领域最新进展。本站对发布的资讯内容，并不代表同意其描述和观点，仅为提供更多信息。若涉及版权问题，烦请权利人与我们联系，我们将尽快处理。仅供医疗卫生专业人士为了解资讯使用。该等信息不能以任何方式取代专业的医疗指导，也不应被视为诊疗建议。如该等信息被用于了解资讯以外的目的，本站及作者不承担相关责任。预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇