野生/示踪细胞株专题系列一
小鼠乳腺癌细胞4T1(CellcookCat:CC)
一、4T1细胞株简介
本次专题向各位读者介绍的细胞株为小鼠乳腺癌细胞4T1。乳腺癌是年轻女性中最常见的癌症之一，在所有患癌女性当中，乳腺癌的发病比例及死亡比例都位居前列，其对女性身心健康之危害可见一斑。因此，对乳腺癌的研究热度连年上升，相关文章数量已连续7年超过篇/年，且仍在不断增加。
为了更好地开展对乳腺癌的研究，合适的细胞模型就显得尤为重要。其中，小鼠乳腺癌细胞模型就能够很好地模拟人体乳腺癌的特性，在疾病发生机理研究等方面具有十分重要的理论价值和临床意义。
4T1细胞株是从.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌呤抗性细胞株，为贴壁依赖型上皮细胞样细胞。其培养条件为RPMI+10%FBS（CellcookCat:CM，南美血源），传代比例为1:4~1:6。值得注意的是，4T1细胞建议在生长至80%汇合度时即应传代，以免细胞状态变差。
4TX南美血清在作为乳腺癌细胞模型方面，当注射到BALB/c小鼠中时，4T1自发产生高转移肿瘤，可转移到肺，肝，淋巴结和大脑，同时在注射部位形成始发灶。诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近。这种肿瘤是人VI期乳腺癌的动物模型。4T1诱导的肿瘤在手术后及未手术情况下转移的动力学相近，可以用作手术后及未手术模型。跟其他肿瘤模型相比，由于4T1的抗6-硫鸟嘌呤特性，微小的转移细胞团(少到仅仅1个)也可在远距离组织中检测出来，比大部分肿瘤模型都更加准确，因为不需要数结节数或者称量靶标组织重量。
二、4T1示踪细胞株
我们在经STR鉴定身份确定的野生型4T1细胞株的基础上，构建了具有不同报告基因的4T1细胞示踪株，包括较之增强绿色荧光蛋白（eGFP）更亮的桡足类绿色荧光蛋白（copGFP）以及萤火虫荧光素酶（Fluc）报告基因。
为了在保证报告基因蛋白高组成型表达的同时确保生物安全，我们采用“第三代”慢病毒载体，其基因组的3’LTR的增强子功能发生了缺失，从而形成了“自灭活”（Self-inactivation，SIN），即该病毒基因组整合到细胞基因组后，不会产生新的子代病毒，也降低了对周围基因的意外激活，因此具有较好的安全性。
4T1示踪细胞系可以在动物体内进行追踪，从而使其成为研究肿瘤生长和转移机制，以及评估各种药物或疗法在动物体内效果的实用工具。