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我的闺蜜老红帽
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免疫治疗是现今癌症治疗的里程碑式发现。它通过激活抗肿瘤的细胞免疫，使得机体产生长效且持久的应答。值得注意的是，靶向T淋巴细胞的免疫抑制性分子CTLA-4和PD-1的免疫检查点抑制剂（checkpointinhibitors，CPIs）治疗方案可以有效提高多种恶性肿瘤的生存率，但是，对于罹患过渡性上皮细胞癌（transitionalcellcarcinoma，简称TCC），比如对膀胱癌的患者来说，如果只使用免疫治疗，只对大约百分之二十的患者有一定效果。究其原因，大约是肿瘤浸润的T淋巴细胞（tumor-infiltratingTlymphocytes，TILs）的异质性，以及因细胞异质性所导致的细胞应答和治疗效果差异。
目前学界认为，免疫治疗主要是通过细胞*性CD8+T细胞来实现的。对于黑色素瘤，CD8+T细胞的水平和应答状态与靶向PD-1的治疗效果直接相关。但是，对于罹患已扩散膀胱TCC的患者来说，含铂化疗（platinumchemotherapy-refractorypatients）耐受的病人仅有15%~20%对PD-L1治疗起反应。而近期一项RNA测序结果显示，未经治疗的TCC病人肿瘤微环境中含有高水平的CD8+T细胞基因表达标签（genesignature），但与之相反的是，TGF-b的基因表达标签水平却很低。当然，除了CD8+T细胞，其他T细胞亚型，比如CD4+T细胞以及其亚类调节性T细胞（regulatoryTcells，简称Tregs）在TCC发生发展中的作用，以及对靶向PD-1的免疫治疗效果的影响，仍旧不得而知。
近日，来自美国加州大学的ChunJimmieYe和LawrenceFong研究组在Cell杂志上发表题为IntratumoralCD4TCellsMediateAnti-tumorCytotoxicityinHumanBladderCancer的文章，发现在人类膀胱癌中，细胞*性CD4+T细胞的富集水平要高于CD8+T细胞，并且，这些细胞可以有效杀伤自身肿瘤细胞。
首先，作者招募了7位罹患已发生肌肉转移的膀胱癌（muscle-invasivebladdercancer，MIBC）志愿者，其中，2位未经治疗，1位进行了化疗，剩余4位进行了靶向PD-1的免疫治疗。作者共从这7位志愿者中采集了个CD8+T细胞，其中，个细胞来自于恶性肿瘤组织（tumor），个细胞来自于邻近的非恶性组织（non-malignant）。接下来作者进行单细胞RNA测序以及对应的T细胞受体测序（Tcellreceptorsequencing）实验，通过测序结果，将这些细胞分为11类，并惊讶地发现，虽然之前定义的一类对肿瘤发生特异性应答的CD8+T细胞（表达TIM-3，LAG3，ENTPD1和CXCL13，简称CD8ENTPD1）表达水平较高，但是，这11类CD8+T细胞在肿瘤组织和非肿瘤组织中的水平差异均没有统计学意义。
作者还发现，在膀胱肿瘤中，CD4+T细胞的水平要高于CD8+T细胞，因此，作者以CD4+T细胞为研究对象。作者从相同的7个志愿者处采集和分析了个CD4+T细胞，其中个来自于肿瘤组织，个来源于非恶性组织。测序结果显示，这些细胞同样可以分为11组，并且，不同的病人，各类CD4+T细胞的水平也不尽相同。值得注意的是，CD4CXCL13在肿瘤组织中的水平更高，而CD4CM和CD4ACTIVATED在非恶性组织中水平更高。膀胱癌肿瘤中也存在了一定量的Tregs。作者发现这些Treg可以分为两类（CD4IL2RAHI和CD4IL2RALO），并且确定，肿瘤中的这两类Treg水平都要显著高于非恶性组织，且是瘤内克隆扩增水平最高的细胞种类。
测序结果还明确了两类细胞*性CD4+T细胞（CD4GZMB和CD4GZMK）。作者通过流式细胞术，进一步定义和确定了这两类细胞，并发现，在FOXP3_CCR7_CD4+T细胞中，约有9%表达GZMB，而约有16%表达GZMK。值得注意的是，CD45-膀胱癌细胞可以表达II型组织相容性复合物（majorhisto