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人体乳腺癌模型4T1 [复制链接]

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野生/示踪细胞株专题系列一

小鼠乳腺癌细胞4T1(CellcookCat:CC)

一、4T1细胞株简介

本次专题向各位读者介绍的细胞株为小鼠乳腺癌细胞4T1。乳腺癌是年轻女性中最常见的癌症之一,在所有患癌女性当中,乳腺癌的发病比例及死亡比例都位居前列,其对女性身心健康之危害可见一斑。因此,对乳腺癌的研究热度连年上升,相关文章数量已连续7年超过篇/年,且仍在不断增加。

为了更好地开展对乳腺癌的研究,合适的细胞模型就显得尤为重要。其中,小鼠乳腺癌细胞模型就能够很好地模拟人体乳腺癌的特性,在疾病发生机理研究等方面具有十分重要的理论价值和临床意义。

4T1细胞株是从.4瘤株中未经诱变筛得的6-硫鸟嘌呤抗性细胞株,为贴壁依赖型上皮细胞样细胞。其培养条件为RPMI+10%FBS(CellcookCat:CM,南美血源),传代比例为1:4~1:6。值得注意的是,4T1细胞建议在生长至80%汇合度时即应传代,以免细胞状态变差。

4TX南美血清

在作为乳腺癌细胞模型方面,当注射到BALB/c小鼠中时,4T1自发产生高转移肿瘤,可转移到肺,肝,淋巴结和大脑,同时在注射部位形成始发灶。诱导转移时不需要摘除始发灶。4T1细胞在BALB/c小鼠中的生长与转移特性与人体中的乳腺癌十分相近。这种肿瘤是人VI期乳腺癌的动物模型。4T1诱导的肿瘤在手术后及未手术情况下转移的动力学相近,可以用作手术后及未手术模型。跟其他肿瘤模型相比,由于4T1的抗6-硫鸟嘌呤特性,微小的转移细胞团(少到仅仅1个)也可在远距离组织中检测出来,比大部分肿瘤模型都更加准确,因为不需要数结节数或者称量靶标组织重量。

二、4T1示踪细胞株

我们在经STR鉴定身份确定的野生型4T1细胞株的基础上,构建了具有不同报告基因的4T1细胞示踪株,包括较之增强绿色荧光蛋白(eGFP)更亮的桡足类绿色荧光蛋白(copGFP)以及萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因。

为了在保证报告基因蛋白高组成型表达的同时确保生物安全,我们采用“第三代”慢病*载体,其基因组的3’LTR的增强子功能发生了缺失,从而形成了“自灭活”(Self-inactivation,SIN),即该病*基因组整合到细胞基因组后,不会产生新的子代病*,也降低了对周围基因的意外激活,因此具有较好的安全性。

4T1示踪细胞系可以在动物体内进行追踪,从而使其成为研究肿瘤生长和转移机制,以及评估各种药物或疗法在动物体内效果的实用工具。

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