北京皮肤病医院好 http://pf.39.net/bdfyy/tslf/180306/6084106.html撰文
Qi
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免疫检查点阻断疗法（ICB）能触发持久的抗肿瘤免疫反应，但缺乏淋巴细胞浸润的肿瘤（“冷”肿瘤），对ICB疗法具有抗性。反过来想，如果增加冷肿瘤的T细胞浸润可能会增强它们对ICB疗法的敏感性。3型先天性淋巴细胞（ILC3s）包括表达天然细胞*性受体（naturalcytotoxicityreceptor,NCR）、趋化因子受体6（CCR6）的ILC3s，以及淋巴组织诱导细胞（lymphoidtissueinducer,LTi）。然而，LTi在抗肿瘤中的作用是矛盾的，比如ILC3s积累与乳腺癌和结直肠癌的不良结局有关，但在非小细胞肺癌（NSCLC）和黑色素瘤中的作用相反。需要注意的是，在NSCLC中，ILC3s与三级淋巴结构的存在呈正相关，说明ILC3s可能具有淋巴细胞募集能力。此外，趋化因子CCL20通常以低水平表达，但可被TNF和IL-1β等促炎信号强烈诱导。CCL20是CCR6的独特配体，因而ILC3s表面表达CCR6引起这些细胞被CCL20募集。根据这些信息，可以推断富含CCL20和IL-1β的环境可能具有活化的CCR6+ILC3s。
以顺铂为基础的化疗与ICB联合是转移性NSCLC的标准一线治疗方法，但两者之间协同作用的机制仍有待确定，目前的主要猜想是，顺铂可能通过某种机制将“冷”肿瘤转变为免疫细胞浸润更丰富的“热”肿瘤来发挥效用。
年1月31日，来自法国EquipeLabelliséeLigueContreleCancer的MélanieBruchard团队在NatureImmunology杂志上发表了一篇题为“Recruitmentandactivationoftype3innatelymphoidcellspromoteantitumorimmuneresponses”的文章，该团队利用肿瘤小鼠模型发现顺铂给药后，肿瘤部位可以产生CCL20和IL-1β，导致ILC3s的募集和激活，而ILC3s通过产生CXCL10负责向肿瘤募集CD4+和CD8+T淋巴细胞，从而提高抗肿瘤免疫力和对ICB的反应。这一发现对于解释顺铂的抗肿瘤机制至关重要。
研究人员选取小鼠的“冷”肿瘤（如TC-1肺癌、4T1乳腺癌）和“热”肿瘤（如MC38结肠癌）模型来完成实验。在TC-1模型的顺铂给药后，通过流式对肿瘤内免疫细胞群进行分析，发现ILC3s是首个在肿瘤中积累的细胞类型，而CCR6+ILC3是最常见的子集，不仅如此，作者还观察到ILC3积累与CD8+和CD4+T细胞积累之间的相关性。为了证明CCR6+ILC3是否对顺铂的抗肿瘤作用有影响，作者对TC-1和4T1模型使用两种RORγt抑制剂地高辛和GSK，前者能同时消耗ILC3和Th17细胞，而后者仅能消耗Th17细胞。地高辛的给药能明显削弱顺铂在后期诱导的其他免疫细胞的募集，降低抗肿瘤作用，而GSK的给药对肿瘤生长没有任何影响，强调ILC3对顺铂抗肿瘤作用至关重要。
TC-1模型中T细胞上表达最多的检查点抑制剂靶点是CTLA-4，研究人员用顺铂和抗CTLA-4组合治疗TC-1肿瘤以研究ILC3对ICB抗肿瘤功效的影响。在地高辛给药后，组合治疗丧失了对TC-1肿瘤生长的抑制作用。类似的，在热肿瘤模型MC38小鼠中，ILC3s的消耗显着削弱了抗PD-1和抗CTLA-4的组合疗效。这些发现强调了ILC3在ICB的抗冷热肿瘤功效中都是必不可少的。
那么ILC3是如何在顺铂治疗后引起肿瘤部位的免疫细胞数量增加呢？为此，作者对TC-1肿瘤分选的淋巴细胞进行scRNA-seq，发现在顺铂治疗后，ILC3表达高水平的，已知有利于淋巴细胞募集的趋化因子CXCL10。如果在体内使用针对CXCL10受体的抗体，则能显着降低顺铂对肿瘤生长的控制，而在此时添加地高辛并没有进一步降低疗效。此外，抗体的阻断作用还减少了除ILC3群体外的免疫细胞浸润。这些数据表明ILC3通过表达CXCL10来募集淋巴细胞，能将冷肿瘤转变为热肿瘤。
然而，顺铂本身并不能增强CCR6+ILC3的增殖。作者进一步对治疗后肿瘤中的细胞因子和趋化因子进行筛选和动力学分析，发现顺铂可以诱导CCL20，作为CCR6的配体，CCL20也是CCR6表达细胞的趋化因子。离体分析也使得研究人员确认肿瘤细胞是顺铂处理后CCL20的主要产生者，也是诱导的唯一细胞类型。如果在TC-1小鼠中使用CCL20阻断抗体可以大大减少CCR6+ILC3的数量，以及随后CD4+和CD8+T细胞等免疫细胞的募集，伴随着顺铂功效的降低。类似作用也在MC38小鼠模型中得到鉴定。
此外，作者还发现顺铂治疗后，肿瘤中的IL-1β增加，scRNA-seq也显示CCR6+ILC3簇中的IL-1R富集，提示顺铂以IL-1β依赖性的方式诱导它们的活化。使用IL-1RA抑制IL-1β会导致ILC3的活化和积累以及CXCL10的产生减少。考虑到CCL20和IL-1β的重要性，作者将它们联合注射到TC-1小鼠中。结果显示肿瘤中CCR6+ILC3、CD8+和CD4+T细胞数量的明显增加，同时也阻碍了肿瘤生长。如果将两者注射到MC38小鼠肿瘤中，可以明显提高肿瘤对ICB的反应。但如果使用地高辛，则会消除上述所有益处。由此可见，CCL20和IL-1β在ILC3募集和激活以及肿瘤免疫浸润中的关键作用。
总之，这项研究解释了顺铂的抗肿瘤分子机制，揭示了ILC3细胞在化疗后塑造肿瘤免疫浸润和抗肿瘤功效方面的重要作用。此外，使用ILC3或CCL20和IL-1β组合疗法或许能成为一种有效的，将T细胞浸润较差的“冷”肿瘤转变为对ICB有反应的“热”肿瘤的治疗策略。
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