淋巴肉瘤

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H9人T淋巴瘤细胞基础介绍与培养传代 [复制链接]

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细胞介绍

H9细胞是HUT78(ATCCTIB)的克隆系(Gallo,RC,etal)。细胞表面带有CD、CD4标记。研究表明,该细胞系对人体免疫缺陷病*(HIV-1)敏感,可用于检测、分离和增殖HIV-1,也可用于其它人类Tcell病*的研究。

基本信息

细胞别称:HTcloneH9;HT(H9);H-9

细胞来源:外周血

细胞形态:淋巴母细胞样

生长特性:悬浮生长

安全等级:BSL1

包装规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

倍增时间:2~天

传代比例:5×10^5-2×10^6cells/ml

保藏机构:ATCC;HTB-;CCTCC;GDC;ECACC;8505

培养保存

培养体系:RPMI-+10%FBS

培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%;温度:7℃

冻存条件:基础培养基+8%DMSO+20%FBS,液氮保存

传代步骤

悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态;

一般情况下细胞密度维持在1×10^5~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同)可以维持细胞的正常生长;

如需分瓶可以将细胞悬液收集到无菌离心管中rpm,离心10min;

弃去上清,加入6-8ml新鲜培养基,重悬细胞,温柔吹打;

将细胞悬液转移到新T25瓶中,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

冻存步骤

配置细胞冻存液,放置4℃预冷;

将培养瓶内细胞悬液用吸管完全吸出,转移到无菌离心管中,取细胞悬液计数;

rpm离心10min,弃去上清,加适量细胞冻存液,重悬细胞;

将细胞悬液分装到1ml冻存管中;(4℃预冷0min)

将冻存管转入程序降温盒中(程序降温盒需提前在4℃预冷),于-80℃过夜;

从程序降温盒中取出冻存管,快速转移到液氮中保存。

细胞用途

仅供科研使用。

质检结果

支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性。

注意事项

1.收到常温细胞后,请检查产品包装状况,若发现破损、溢出及污染,请及时联系我们。2.先不打开培养瓶盖,用75%酒精处理培养瓶表面,如果是贴壁细胞,请在培养箱中静置2-小时(根据细胞密度状况决定)用来稳定细胞状态。如果是悬浮细胞则不需要静置,直接按照悬浮细胞步骤操作。.静置完成后,在显微镜下确认细胞生长状态并拍照记录。(照片能有效帮助我们提供售后服务)4.细胞培养过程中如有异常状况,欢迎进行技术交流。

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